內容簡介

本書作者克里斯托弗‧豪是劍橋大學植物與微生物生物化學專業的教授,教授分子生物學達20年。本書是對第一版的完全更新,反映了基因克隆和操作領域最新的進展,對重組DNA技術進行了全面而簡潔的介紹︰首先闡釋了生物化學的基本原理;然後介紹了PCR以及使用大腸桿菌宿主和質粒、噬菌體和雜合載體進行克隆;之後介紹了文庫的構建和篩選,以及如何對克隆化序列進行改造、滅活和表達;最後討論了在許多其他生物中進行的遺傳操作,包括細菌、真菌、藻類,以及植物、昆蟲和哺乳動物。本書是為要使用重組DNA技術的高年級本科生、研究生和科研工作者而作,重點放在特定類型克隆載體上,以幫助讀者理解並能夠在新的實驗狀態下提出適當的策略。本書還介紹了一系列“現實的”生物學問題,以使讀者能夠評估自己對知識的理解並準備考試。
 

目錄

譯者序
第二版前言
第一版前言
第1章 工具
1.1 前言
1.2 切割
1.3 修飾
1.4 連接
1.5 轉化
1.6 從大腸桿菌中純化質粒DNA
1.7 核酸的凝膠電泳
1.8 寡核 酸合成
1.9 微陣列
第2章 聚合黴鏈反應
2.1 基本技術
2.2 預防措施和缺點
2.3 改良
第3章 簡單克隆
3.1 基本實驗
3.2 載體、轉化和宿主
3.3 修飾
3.4 接頭、餃接子和序列盒
第4章 用于大腸桿菌的其他載體系統
4.1 前言
4.2 BAC載體
4.3 M13噬菌體載體
4.4 λ噬菌體
4.5 黏粒
4.6 Mu噬菌體
4.7 P1噬菌體
第5章 文庫構建
5.1 前言
5.2 基因組文庫
5.3 cDNA文庫
5.4 專業文庫
第6章 文庫篩選
6.1 前言
6.2 數據庫篩選
6.3 編碼功能的實驗篩選
6.4 其他功能的篩選︰報告基因
第7章 改造與誘變
7.1 前言
7.2 基于限制性內切核酸黴的方法
7.3 寡核 酸定向誘變
7.4 選擇正確的突變
7.5 滅活基因
第8章 克隆化DNA的應用
8.1 作為DNA使用
8.2 RNA的合成
8.3 蛋白質的合成
8.4 體外翻譯
8.5 體內表達
8.6 研究基因功能︰報告基因和標簽
第9章 使用其他生物
9.1 前言
9.2 細菌
9.3 釀酒酵母
9.4 其他真菌
9.5 藻類
9.6 維管植物
9.7 細胞器轉化
9.8 秀麗隱桿線蟲
9.9 昆蟲
9.10 哺乳動物
第10章 實例
10.1 前言
參考文獻
索引
 

近年來,基因工程技術已得到飛速的發展,已應用到生物科學的方方面面。需要掌握和學習基因工程技術的人越來越多,而一本好的教材可以達到事半功倍的學習效果。《基因克隆與操作》來源于劍橋大學克里斯托弗‧豪教授給大學生上生物化學和分子生物學課的系列講稿。他集20年的教學經驗精心編寫的這本書內容豐富,涵蓋了基因工程相關的原理、技術和方法;語言簡練、通俗易懂,即使是初學者也可以很容易掌握。

這本書第一章介紹了基因克隆與操作所需要的各種黴和相關技術,如各種轉化方法、電泳和印跡等;第二章詳細介紹了PCR的原理、方法和應用,通過這一章的學習,可以全面地掌握PCR技術;第三、第四章介紹了克隆的方法,對常用的載體和宿主以及各種克隆技術進行了簡明扼要的介紹,可以使讀者靈活掌握各種克隆技巧;第五、第六章介紹了DNA文庫和cDNA文庫的構建、篩選及應用;第七章介紹了DNA改造的技術,通過學習,可以隨心所欲地對DNA序列進行改造,以滿足不同的需要;第八章介紹了克隆化DNA的應用,重點介紹了蛋白質的表達,包括蛋白質純化,可以使讀者初步了解克隆技術的應用;第九章介紹了大腸桿菌以外的其他細菌、真菌、藻類、植物、昆蟲和哺乳動物的基因操作技術,可以使我們對基因工程技術有一個更全面的認識;第十章介紹了一些應用實例,可以使讀者綜合運用這本書的各種技術,解決某個具體的問題,開闊思路。

總之,這本書是一本很好的基因工程技術的教材,適合于學習生物相關專業的學生和從事相關研究的研究人員使用。

在這本書翻譯過程中得到了首都醫科大學丁衛教授、科學出版社莫結勝編輯等的大力幫助,在此表示衷心的感謝!同時,歡迎廣大讀者對書中翻譯存在的謬誤給予指正,不勝感激!

李慎濤
2010年4月12日于首都醫科大學
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