精編分子生物學實驗指南

譯者序
前言　
第1章　大腸桿菌、質粒和噬菌體　
第2章　DNA的制備和分析　
第3章　DNA和RNA的黴學操作　
第4章　RNA的制備和分析　
第5章　重組DNA文庫的構建　
第6章　重級DNA文庫的篩選　
第7章　DNA序列測定　
第8章　克隆化DNA的誘變　
第9章　DNA導入哺乳動物細胞　
第10章　蛋白質分析　
第11章　免疫學　
第12章　DNA-蛋白質相互作用　
第13章　釀酒酵母..　
第14章　原位雜交和免疫組織化學　
第15章　聚合黴鏈反應（PCR）　
第16章　蛋白質的表達　
第17章　蛋白質磷酸化的分析
第18章　生物信息學
第19章　蛋白質相互作用的分析
第20章　染色質的裝配與分析
第21章　核酸陣列
第22章　組合文庫的建立和使用
第23章　單個細胞或-群細胞間差異表達基因的發現和分析
附錄1　試劑和溶液
附錄2　實用測量值和數據
附錄3　生物化學和分子生物學常用技術
附錄4　試劑和設備的供應商
附錄5　參考文獻
索引

20世紀80年代初，當時的中國科學院上海生物化學研究所祁國榮研究員（時任該所核糖核酸研究生副主任，室主任為王德寶院士），第一個從國外帶回了Molecular Cloning:A Laboratory Manual一書。該書通過上海生物化學研究所和中國生物化學學會傳遍了中國生化與分子生物學界，大大促進了我國生化與分子生物學的學科發展。

80年代後期起，該書有多種中文譯本出版。其中由病毒基因工程國家重點實驗室金冬雁博士、黎孟楓博士主譯的《分子克隆實驗指南》第二版自1992年發行以來已成為我國生命科學領域最暢銷的圖書之一，對我國生物技術的普及和提高發揮了十分重要的作用。

由病毒基因工程國家重點實驗室顏子穎博士、王海林博士主譯，金冬雁博士統校的《精編分子生物學實驗指南》（Short Protocols in Molecular Biology，Fredrick M.Ausubel等主編）第三版自1998年發行以來也已成為我國分子生物學技術領域深受歡迎的另一本參考書。

2004年底，由病毒基因工程國家重點實驗室馬學軍博士、舒躍龍博士主持，在上一版的基礎上，《精編分子生物學實驗指南》第四版被譯出，由科學出版社出版發行。

2006年夏，我正在美國訪問期間，接到科學出版社馬學海先生的電子郵件，詢問我能否組織《精編分子生物學實驗指南》第五版的翻譯。當時我正在主持RNA Metho-dology一書的翻譯（該書于2007年由化學工業出版社出版）。當時我正在主持RNA Metho-dology一書的翻譯（該書于2007年由化學工業出版社出版）。因此直到2006年冬季，RNA Methodology的翻譯已開始最後一遍校對時，我才接受了本書的翻譯工作。

新版的內容覆蓋了當今分子生物學的主要技術，它和《分子克隆實驗指南》被西方學者並稱為現代生物科學技術的“聖經”。《精編分子生物學實驗指南》第五版全書共23章，除保留了第四版的內容外，增加了四章全新內容（第20章染色質的裝配與分析；第21章核酸陳列，第22章組合文庫的建立和使用；第23章單個細胞或一群細胞間差異表達基因的發現和分析）。此外部分章節還做了較大的刪減和增改，反映了分子生物學主要技術的最新進展。例如︰第2章新增了寡核 酸的合成及純化等；第3章刪減了用限制性內切核酸黴部分消化及多黴消化進行DNA作圖等；第4章新增了新轉錄RNA的鑒定等；第6章新增了用單克隆抗體表達克隆、用重組方法（RBA）篩選r噬菌體文庫等；第7章新增了小量制備用于化學測序的重組質粒DNA、化學測序法等，刪減了DNA和蛋白質序列的計算機處理和分析等；第8章新增了PCR介導的隨機突變等，刪減了無垵表型選擇的寡核 酸的誘變及區域特異性誘變等；第9章新增了陽離子脂質體介導的真核細胞轉染、用維多利水母綠色熒光蛋白（GFP）研究體內蛋白動力學等，刪減了脂質體介導的轉染等；第10章新增了宣氨基酸的分析，“多 和蛋白質的HPLC”中的準備工作、系統組裝及標準操作條件，蛋白質和多 的毛細管電泳等；第11章增加了老鼠的免疫、多克隆抗血清的制備等，刪減了兔多克隆抗血清的制備等；第13章新增了酵母菌基因組轉座子的誘變，以及斜面的制備與接種，郵寄和復蘇細胞等；第14章新增了RNA在脊椎動物的胚胎和器官中的整體標本原位雜交和檢測，熒光顯微鏡的原理及使用，共聚焦顯微術基本原理，原位雜交檢測，細胞凋亡形態的生化性質和流式細胞儀檢測，B半乳塘 黴活性的整體封片免疫組化檢測等；第16章新增了從哺乳動物細胞中表達和純化抗原決定簇標記的多亞基蛋白復合體等，刪減了麥芽糖結合蛋白融合蛋白的表達及純化等；第17章新增了特異性識別酷氨酸磷酸化 的抗體的制備，磷酸 圖譜和磷酸化位點的鑒定等；第19章新增了表面等離子共振技術，用共沉澱法檢測蛋白質-蛋白質之間的相互作用，用Far Western分析識別蛋白質相互作用等。在第五版的附錄部分新增了凝膠和印跡實驗中放射性標記蛋白質和DNA的檢測及定量（附錄3A）；刪叛亂了放射自顯影；附錄3D中新增了用DNA結合熒光染料Hoechst33258檢測DNA，以及用溴化乙錠熒光檢測DNA和RNA。

很高興在德國獲得博士學位並有多年海外工作經驗的趙麗雲女士于2007年仲春加盟我實驗室，參加了本書的校對工作。我妻子包慧中女士是我大學和研究生時期的同學。她從生物高技術公司副總工程師、開發部主任位置上退休後，就一直在我實驗室工作。她們兩人為本書投入了大量的精力。其他參與本書翻譯的人員有本實驗室的史毅、陳祥龍、郭立濤、趙波濤四位博士，我的五位博士研究生以及在我實驗室工作的其他單位的碩士生、博士生。希望本書的出版發行將一如既往地有助于我國分子生物學技術的進一步發展和提高。

金由辛
二零零七年十二月十日于上海
中國科學院上海生命科學院研究院
生物化學與細胞生物學研究所分子生物學國家重點實驗室