《分子克隆實驗指南》的前兩版以其無克匹敵的聲譽,在近20年的時間里一直被作為分子生物學實驗的經典參考書。在第三版中,作者對圖書內容進行了完全的升級,修訂了實驗的每條方案,增加了大量新的材料,拓寬了它涉及的領域,內容豐富而詳細,使其具有用於學習遺傳學、分子細胞生物學、發育生物學、微生物學、神經科學和免疫學等科學的重要指導和參考價值。本書具有先進性、實用性、權威性的特點,是生命科學實驗室內當之無愧的「聖經」。
本書可供生物學、醫藥衛生,以及農、林、牧等方面有關的科研、教學與技術人員參考。
目錄
導言
方案1 建立隨機重疊DNA插入文庫
·替代方案:M13噬菌體小量單鏈DNA模板制備
·附加方案:隨機克隆用去磷酸化平末端M13噬菌體載體DNA制備
方案2雙脫氧鏈終止法測序用變性模板的制備
·附加方案:雙鏈DNA的快速變性
·附加方案:聚乙二醇沉淀法小量純化質粒DNA
方案3用T7噬菌體DNA聚合酶(測序酶)進行雙脫氧測序反應
方案4 用大腸桿菌DNA聚合酶I K1enow片段及單鏈DNA模板進行雙脫氧測序
方案5用Taq DNA聚合酶進行雙脫氧測序反應
方案6循環測序:利用PCR和引物末端標記進行雙脫氧測序
方案7化學測序法
·替代方案:快速Maxam-Gilbert測序法
·附加方案:制備化學測序中的末端標記DNA
方案8 變性聚丙烯 胺凝膠的制備
方案9 含甲 胺的聚丙烯 胺凝膠的制備
方案10配制電解質梯度膠
方案11上樣並進行DNA測序
方案12放射自顯影和從測序凝膠上讀取DNA序列
信息欄
自動化DNA測序
微量滴定板
E.coli DNA聚合酶I的Klenow片段
用於測序的寡核 酸引物的貯存液的制備
測序酶
使用PcR擴增DNA進行傳統的鏈終止測序
用於DNA測序的dNTPs和ddNTPs貯存液的制備
DNA序列測定中的甘油
在DNA測序凝膠中的壓縮現象
7一脫氮一dGTP
二氯二甲基 烷
閱讀放射自顯影相片
DNA的電泳遷移率
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方案1 建立隨機重疊DNA插入文庫
·替代方案:M13噬菌體小量單鏈DNA模板制備
·附加方案:隨機克隆用去磷酸化平末端M13噬菌體載體DNA制備
方案2雙脫氧鏈終止法測序用變性模板的制備
·附加方案:雙鏈DNA的快速變性
·附加方案:聚乙二醇沉淀法小量純化質粒DNA
方案3用T7噬菌體DNA聚合酶(測序酶)進行雙脫氧測序反應
方案4 用大腸桿菌DNA聚合酶I K1enow片段及單鏈DNA模板進行雙脫氧測序
方案5用Taq DNA聚合酶進行雙脫氧測序反應
方案6循環測序:利用PCR和引物末端標記進行雙脫氧測序
方案7化學測序法
·替代方案:快速Maxam-Gilbert測序法
·附加方案:制備化學測序中的末端標記DNA
方案8 變性聚丙烯 胺凝膠的制備
方案9 含甲 胺的聚丙烯 胺凝膠的制備
方案10配制電解質梯度膠
方案11上樣並進行DNA測序
方案12放射自顯影和從測序凝膠上讀取DNA序列
信息欄
自動化DNA測序
微量滴定板
E.coli DNA聚合酶I的Klenow片段
用於測序的寡核 酸引物的貯存液的制備
測序酶
使用PcR擴增DNA進行傳統的鏈終止測序
用於DNA測序的dNTPs和ddNTPs貯存液的制備
DNA序列測定中的甘油
在DNA測序凝膠中的壓縮現象
7一脫氮一dGTP
二氯二甲基 烷
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DNA的電泳遷移率
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