現代分子生物學實驗原理與技術

序
前言
第一篇 基本操作篇
第一章 緒論
第一節 基因操作技術
第二節 實驗室規則與安全
第二章 儀器操作與溶液配制
第一節 常用器皿與儀器
第二節 溶液
第三章 大腸桿菌培養與保存
第一節 培養前准備
第二節 大腸桿菌培養
第三節 大腸桿菌菌株保存
第四章 基因操作中的酶學反應
第一節 常用酶的選購與保存
第二節 限制性內切核酸酶
第三節 限制性內切核酸酶消化DNA實驗
第四節 DNA作圖
第五節 連接酶
第六節 其他核酸酶
第五章 電泳技術
第一節 基本原理
第二節 瓊脂糖凝膠電泳
第三節 從瓊脂糖凝膠中回收DNA
第四節 聚丙烯酰胺凝膠電泳
第五節 從聚丙烯酰胺凝膠中回收DNA
第二篇 DNA篇
第六章 DNA基本操作
第一節 DNA保存
第二節 DNA檢測
第三節 DNA濃縮
第四節 DNA純化
第七章 擴增與提取質粒DNA
第一節 質粒有關基本知識
第二節 質粒DNA提取
第三節 質粒DNA純化
第八章 DNA轉化
第一節 制備感受態細胞
第二節 轉化
第九章 擴增與提取噬菌體DNA
第一節 噬菌體生活史
第二節 感染力測定
第三節 噬菌體回收與繁殖
第四節 提取噬菌體DNA
第十章 提取真核生物基因組DNA 與構建基因組文庫
第一節 SDS/酚法提取基因組DNA
第二節 試劑盒法提取基因組DNA
第三節 CTAB法提取基因組DNA
第四節 構建基因組DNA文庫
第十一章 PCR基本操作
第一節 PCR基本原理
第二節 引物設計
第三節 耐熱DNA聚合酶
第四節 PCR儀
第五節 PCR基本操作
第六節 PCR實例
第七節 預防污染
第八節 熱啟動
第十二章 DNA重組
第一節 重組流程
第二節 插入DNA的准備
第三節 載體的准備
第四節 連接
第五節 插入DNA的修飾與改造
第六節 轉化
第七節 重組子篩選
第十三章 探針制備
第一節 探針標記法
第二節 隨機引物法
第三節 末端標記法
第四節 探針純化
第十四章 PCR產物克隆
第一節 PCR產物重組策略
第二節 PCR產物的純化
第三節 末端平齊
第四節 TA克隆
第五節 添加限制性內切核酸酶識別序列
第十五章 PCR應用
第一節 菌落PCR
第二節 簡並引物PCR
第十六章 Southern印跡
第一節 DNA酶切
第二節 瓊脂糖凝膠電泳
第三節 變性、轉膜與固定
第四節 雜交
第十七章 分子標記
第一節 微衛星標記
第二節 RFLP與RAPD
第十八章 DNA序列測定與比對
第一節 測序原理
第二節 自動測序儀
第三節 DNA序列的同源比對
第三篇 RNA篇
第十九章 RNA提取
第一節 RNA實驗前的准備
第二節 實驗材料
第三節 用AGPC法提取RNA
第四節 用NP-40法提取RNA
第五節 使用試劑盒提取RNA
第二十章 純化poly(A)+ RNA
第一節 利用oligo(dT)純化poly(A)+ mRNA
第二節 用oligo(dT)·纖維素進行柱層析
第二十一章 構建cDNA文庫
第一節 以質粒為載體構建cDNA文庫
第二節 以λ噬菌體為載體構建cDNA文庫
第二十二章 RT-PCR
第二十三章 RACE
第一節 5’’RACE
第二節 3’’RACE
第二十四章 轉錄分析
第一節 Northern印跡
第二節 RNase保護分析
第四篇 表 達 篇
第二十五章 無細胞蛋白質合成
第一節 概述
第二節 大腸桿菌無細胞蛋白質合成系統
第三節 小麥胚芽無細胞蛋白質合成系統
第二十六章 大腸桿菌表達系統
第一節 表達載體結構
第二節 表達中的問題
第三節 表達實例與SDS-PAGE檢測
第二十七章 枯草桿菌表達系統
第一節 菌株與載體
第二節 轉化
第三節 蛋白質的提取
第二十八章 放線菌表達系統
第一節 菌株與載體
第二節 放線菌培養
第三節 轉化
第四節 蛋白質的提取
第二十九章 釀酒酵母表達系統
第一節 釀酒酵母表達系統概述
第二節 外源基因在釀酒酵母表達系統中的表達
第三十章 畢赤酵母表達系統
第一節 宿主
第二節 重組
第三節 重組基因的表達
第五篇 附 錄
附錄一 儲液配制
附錄二 核酸及蛋白質數據
附錄三 各種識別位點的限制性內切核酸酶分類表
附錄四 部分限制性內切核酸酶需要的保護鹼基
附錄五 篩選重組子用的平板標簽貼紙(Φ=9cm)
附錄六 常用DNA相對分子質量標准物的瓊脂糖凝膠電泳圖像示意圖
附錄七 本書作為教材的使用方法

分子生物學是生命科學領域最重要的、發展最為迅速的學科之一，已成為推動生命科學持續發展的主要動力，有力地推動着復雜生命現象的研究與探索。同時，分子生物學中的實驗技術對生物制藥、生物制品、生物材料以及生物改良等相關產業的發展也產生了巨大的推動力。

教育是科學發展的基礎，分子生物學實驗技術的重要性決定了21世紀生命科學類青年學子必須掌握這一新興技術。為適應這一要求，各高等院校先后為本科生和研究生開設了「分子生物學實驗」這門課程。南開大學是最早開設「生物化學與分子生物學技術」、「基因操作原理與技術」、「分子生物學實驗」等課程的院校之一， 1997年又增加了「分子生物學實驗」的課時，擴大了授課對象，重新制定了新的課程體系，設置了新的教學內容，編寫了與之相適應的新教材。教學實踐證明，陳德富教授等結合自身多年教學與科研經驗編寫的《現代分子生物學實驗原理與技術》是成功的，受到了學校的肯定和學生的歡迎，與國內有關書籍相比有許多獨特性，尤其是以下兩點：

第一，選材恰當。本書分五篇三十章，包括分子生物學基本操作、DNA相關實驗、RNA相關實驗、基因表達及附錄，概括了廣泛使用的現代分子生物學實驗新技術。

第二，圖文並茂。全書使用了近300幅插圖，將分子生物學基本原理和技術流程形象地反映出來，使得本書通俗易懂。

該書是南開大學教材建設資助立項著作，相信本書的出版必將推動我國生物學、醫學、藥學、農學及其他相關學科的發展，必將為生命科學領域各相關專業本科生與研究生的學習提供幫助，該書也可作為相關領域研究人員的參考書。在此，我真誠推薦此書給廣大讀者。